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一、重組蛋白重組蛋白（recombinantprotein）是指應用重組DNA或重組RNA技術(shù)而獲得的蛋白質(zhì)。重組蛋白工程先應用基因克隆或化學合成技術(shù)獲得目的基因（geneofinterest，GOI），連接到適合的表達載體，導入到特定的宿主細胞，利用宿主細胞的遺傳系統(tǒng)，表達出有功能的蛋白質(zhì)分子。重組蛋白的正確溶解步驟包括離心、溶解和（可能的話）進一步處理。二、重組蛋白溶解步驟一開蓋前離心試劑管。凍干粉在運輸過程中可能會因顛簸而漂散并粘貼于管壁或管蓋上，所以在打開塑料瓶蓋前，...

一、前言蛋白質(zhì)印跡法（WesternBlot）通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色，通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細胞或組織中表達情況的分子生物學技術(shù)。WesternBlotting實驗單層貼壁細胞總蛋白的提取步驟：二、操作步驟1.倒掉培養(yǎng)液，并將瓶倒扣在吸水紙上使吸水紙吸干培養(yǎng)液（或?qū)⑵恐绷⒎胖靡粫菏箽堄嗯囵B(yǎng)液流到瓶底然后再用移液器將其吸走）。2.每瓶細胞加3ml4℃預冷的PBS（0.01MpH=7.2～7.3）。平放輕輕搖動1...

一、細胞凍存細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了細胞保種的作用。二、WakoBAMBANKER®無血清細胞凍存液簡介WakoBAMBANKER®無血清細胞凍存液是一款無血清、無動物源且成分明確的即用型細胞凍存液，適用幾乎所有類型細胞株。相比...

一、細胞核結(jié)構(gòu)：細胞核的結(jié)構(gòu)有核膜、核仁、染色質(zhì)、核基質(zhì)。主要功能是遺傳物質(zhì)DNA儲存和復制的主要場所，是細胞遺傳和代謝的控制中心。①核膜：核膜是細胞核的外部邊界，由內(nèi)外兩層單位膜組成，將細胞核與細胞質(zhì)分隔開來。②核孔復合體：核孔復合體是核膜上的特殊結(jié)構(gòu)，由多種蛋白質(zhì)組成，形成環(huán)狀開口，允許大分子物質(zhì)如mRNA、tRNA以及某些蛋白質(zhì)在核質(zhì)之間穿梭。③染色質(zhì)：染色質(zhì)是細胞核內(nèi)的重要組成部分，由DNA和蛋白質(zhì)組成，是遺傳信息的載體。④核仁：核仁是細胞核內(nèi)的一個致密結(jié)構(gòu)區(qū)域，與核...

一、實驗原理?鎳柱純化實驗的原理基于固定化金屬離子親和色譜(IMAC)?，這是一種利用金屬離子與配體之間的特異性相互作用來分離蛋白質(zhì)的方法。鎳柱純化利用Ni2+與帶有咪唑基團的組氨酸(His)標簽的蛋白質(zhì)之間的相互作用，從而實現(xiàn)目的蛋白的純化。具體來說，鎳柱中含有Ni2+離子，這些離子能夠與組氨酸上的咪唑基團形成配位鍵，從而選擇性結(jié)合帶有His標簽的目的蛋白。由于不帶His標簽的蛋白無法與Ni2+形成配位鍵，因此能夠有效地區(qū)分目的蛋白與非目的蛋白。在純化過程中，首先通過Bin...